數(shù)字影像技術(shù)訊速發(fā)展,成為數(shù)碼產(chǎn)品及分子影像產(chǎn)品的風(fēng)向標(biāo),靈敏度越來越高,自動化程度也更高,設(shè)計也更加人性化,逐漸變得像傻瓜照相機一般易用。另外,外型也更加小巧、時尚。分子成像分析系統(tǒng)的實際應(yīng)用逐漸的普遍化,市場上有很多種分子影像成像分析系統(tǒng),如何選購呢?
一、根據(jù)產(chǎn)品應(yīng)用范圍來區(qū)分:
1、普通
全自動凝膠成像分析系統(tǒng):適用于對蛋白凝膠電泳(考馬斯染色,銀染)等可見光樣品,以及DNA/RNA(EB、TLC plates、SYBR Green)等紫外;進行圖象采集并進行定性和定量分析;
2、化學(xué)發(fā)光全自動凝膠成像分析系統(tǒng):適用于化學(xué)發(fā)光/紫外光/可見光凝膠成像分析系統(tǒng),如ECL、ECL PLUS、Southern、CDP Star、CSPD、Northern和Western雜交的化學(xué)發(fā)光等各種化學(xué)發(fā)光暴光后的樣品檢測;
3、多色熒光全自動凝膠成像分析系統(tǒng):適用于熒光/化學(xué)發(fā)光/可見光凝膠成像分析系統(tǒng),如:EB 、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、Sypro Red、Sypro Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、熒光板等的樣品檢測;
4、多功能活體全自動凝膠成像分析系統(tǒng) :適用于生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶(luciferase)基因標(biāo)記細胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用熒光報告基團(GFP、RFP),或 Cyt及dyes等熒光染料進行標(biāo)記。
三、全自動凝膠成像分析系統(tǒng)的組成
凝膠成像系統(tǒng)的基本骨包含:CCD相機,暗室和分析軟件。不過其功能不僅于對瓊脂糠凝膠進行成像,現(xiàn)在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發(fā)熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應(yīng)用。在Western Blot方面,高性能的CCD分子成像系統(tǒng)能與膠片媲美。
CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。絕大多數(shù)對數(shù)碼相機都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數(shù)碼相機的像素看得很重,但比較之后發(fā)現(xiàn),有些400萬、500萬像素的相機拍出來的片子沒有300像素的機子拍出來的好,這是為什么?
其實,影響成像的因素很多,衡量CCD好壞的指標(biāo),有分辨率,CCD尺寸,動態(tài)范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,其中像素數(shù)以及CCD尺寸是重要的指標(biāo)。其實是說感光器件的面積大小,這里就包括了CCD感光器件的面積越大,也即CCD面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。
四、現(xiàn)在分子全自動凝膠成像分析系統(tǒng)的選擇大致來看有這樣的趨勢:
1、專業(yè)研究分子生物學(xué)的在以前已經(jīng)裝配了普通凝膠成像分析系統(tǒng),這兩年有一些有遠見教授或者研究到化學(xué)發(fā)光成像和多色熒光成像方向的實驗室已經(jīng)裝配了,化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),多色熒光成像分析系統(tǒng),這有部分已經(jīng)有一定的數(shù)量了。極少數(shù)實驗室也裝配了多功能活體成像分析系統(tǒng),這在全國是屬于極少數(shù)的。
2、第二類是研究和生物相關(guān)的交叉和邊緣學(xué)科實驗室,才剛剛裝配普通凝膠成像分析系統(tǒng),并且這部分老師對分子影像成像分析系統(tǒng)還沒有完整的了解和系統(tǒng)的操作,他們選擇子影像成像分析系統(tǒng)更沒主意。
3、從現(xiàn)在大的發(fā)展方向來看,專業(yè)研究分子生物學(xué)的已經(jīng)在普通全自動凝膠成像分析系統(tǒng)的基礎(chǔ)之上開始向化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),多色熒光成像分析系統(tǒng)走的趨勢,但是在這中間有一個很大的問題就是絕大多數(shù)的老師很想向化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),多色熒光成像分析系統(tǒng),做并且他們有很多已經(jīng)做到這個方向,但是這些老師沒有接觸過過化學(xué)發(fā)光全自動凝膠成像分析系統(tǒng),多色熒光成像分析系統(tǒng),對他們的具體的功能和操作都沒有足夠的知識,特別是在熒光染料的選擇上面和實際的動物及各種樣本的處理方面有一定得難度。